1、水分。作為生命活動的物質基礎存在。培養基的絕大部分物質為水分。實驗研究中常用的水為蒸餾水，而最理想的水應該為純水，即二次蒸餾的水。生產上，為了降低成本，我們可以用高質量的自來水或軟水來代替。

2、無機鹽類。植物在培養基中可以吸收的大量元素和微量元素都是來自于培養基中的無機鹽。培養基中提供的無機鹽主要有硝酸銨、硝酸鉀、硫酸銨、氯化鈣、硫酸鎂、磷酸二氫鉀、磷酸二氫鈉等，不同的培養基配方當中其含量各不相同。

3、有機營養成分。包括糖類物質，主要用于提供碳源和能源，常見的有蔗糖、葡萄糖、麥芽糖、果糖；維生素類物質，主要用于植物組織的生長和分化，常用的維生素有鹽酸硫胺素、鹽酸吡哆醇、煙酸、生物素等；氨基酸類物質，常見的有甘氨酸、絲氨酸、谷氨酰胺、天冬酰胺等，有助于外植體的生長以及不定芽、不定胚的分化促進。

4、植物生長調節物質。植物生長調節物質在培養基中的用量很小，但是其作用很大。它不僅可以促進植物組織的脫分化和形成愈傷組織，還可以誘導不定芽、不定胚的形成。最常用的有生長素和細胞分裂素，有時也會用到赤霉素和脫落酸。

5、天然有機添加物質。香蕉汁、椰子汁、土豆泥等天然有機添加物質，有時會有良好的效果。但是這些物質的重復性差，還會因高壓滅菌而變性，從而失去效果。

6、凝固劑。要進行固體培養，要在培養基中加入凝固劑。常見的有瓊脂和卡拉膠，用量一般在7～10克/升之間。前者生產中常用，后者透明度高，但價格貴。

7、其他添加物。有時為了減少外植體的褐變，需要向培養基中加入一些防褐變物質，如活性炭、維生素C等。還可以添加一些抗生素物質，以此來抑制雜菌的生長。

8、pH。培養基的pH也是影響植物組織培養成敗的因素之一。pH的高低應根據所培養的植物種類來確定，pH過高或過低，培養基會變硬或變軟。生產上或實驗中，常用氫氧化鈉或鹽酸進行調節。